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    技術支持

    出現以下癥狀,你的細胞正在經歷營養不良

    發布時間:2021-03-22   點擊次數:483次

    不論你是剛入實驗室養細胞的萌新,還是有著數十年細胞培養經驗的大牛,都會碰到細胞生長速度緩慢、形態變差、細胞脫壁、邊緣萎縮等許多問題,明明已經為細胞“鞍前馬后”、關懷備至,但各種意外還是頻頻發生。出現以上狀況,你的細胞很可能是營養不良了。

    細胞在體內依附于機體生長,由血液循環提供能量和物質,在體外培養細胞則需要基礎培養基營造生長環境,并由血清提供細胞生長所需的營養物質,因此血清的質量好壞直接影響細胞生長狀態。所謂“一招不慎,滿盤皆輸”,今天小編就跟大家聊聊在細胞培養中如何選擇優質的血清?

    要想挑選合適的血清,首先我們需要了解血清,血清是什么?血清是指血液凝固后,去除血漿中纖維蛋白原及某些凝血因子后分離出的淡黃色澄清液體。血清是細胞培養中用量大的天然培養基,含有豐富的細胞生長必須的營養成分,發揮著極為重要的功能。血清含有各種氨基酸、維生素、無機物、脂類物質等維持細胞生長必須的營養物質,也含有胰島素、氫-化可的松、地塞-米松、bFGF、EGF、PDGF、轉鐵蛋白等可促進細胞生長的激素、生長因子及結合蛋白。此外,血清還有解毒、緩沖、抑制蛋白酶活性等作用保護細胞不受傷害。

    接下來小編就從血清的分類、血清的來源和制作工藝、血清的檢測標準三個環節給大家講一講如何挑選血清。

    一、 胎牛or新生牛or小牛血清?傻傻分不清

    血清的不同成分及其含量會因供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件的不同而有所差異。按照牛是否出生及出生時間的長短,可將牛血清分為胎牛血清、新生牛血清、小牛血清、成牛血清和供體牛血清。國內外對不同等級牛血清的定義有所區別,上主要參考歐洲藥典和美國藥典頒布的指南,國內則以2015版《中華人民共和國藥典》(以下簡稱中國藥典)為標準。中國藥典僅對新生牛血清做出了規定(表1 國內外對不同等級牛血清的定義)。

    表1,國內外對不同等級牛血清的定義

    · 胎牛血清:胎牛在母體內與外界隔絕,通過心臟穿刺采血,血清中營養成分和細胞因子含量高、異源物質少,品質-佳,是科學研究中-常使用的血清,適用于絕大多數原代細胞和細胞系;

    · 新生牛血清:新生牛出生后控制在一定的時間內采血,成分上比較接近胎牛血清,且來源相較于胎牛血清更加充足,性價比更高,適合培養比較容易生長的腫瘤細胞系,可以滿足有大規模生產血清需求的企業。中國藥典和歐美藥典對于新生牛出生時間的定義存在一定差異;

    · 小牛血清、成牛血清:隨著小牛的生長發育,血清成分會發生變化,如免疫球蛋白含量增加,血清所含的促細胞生長因子、激素及其他活性物質的組份與比例也不同。該類血清異源物質增多,成分也比較復雜,所以對細胞培養的干擾因素比較多,因此小牛血清和成牛血清一般不用于細胞培養,更多用作封閉液、稀釋液等;

    · 供體牛血清:是通過對牛群來源管控、物?隔離和檢驗檢疫,減少外源因子的污染,且利用活體反復采血的方法來生產牛血清,主要作為醫藥生產用血清。

    選擇合適的血清,既要考慮到細胞需求,也要考慮性價比?,F如今,上對不同等級血清的劃分標準和管控要求越發嚴格,分級使用血清已逐漸為各行各業所認可。

    二、源頭放心+工藝安心=品質稱心

    牛血清是一種*產物,因此牛源健康狀況和生長環境就尤為重要。世界動物衛生組織(OIE)對一個國家或地區動物感染疾?。ㄈ绡偱2。┑目赡苄杂幸粋€評價指標,稱為地域性瘋牛病風險評估(GBR),它將每個國家或地區的瘋牛病風險進行分類和監控,以避免瘋牛病的傳播。從*數據來看,澳洲、部分南美洲和北美洲國家沒有瘋牛?。˙SE)和口蹄疫(FMD)疫情,目前中華人民共和國海關總署允許進口的牛血清產地只有澳大利亞、新西蘭和烏拉圭,市面上其他血源地的牛血清都是非法走-私血清。

    走-私血清“魚目混珠”,缺乏檢驗檢疫監管,生產、冷鏈運輸無法保障,批內和批間穩定性無法控制,導致細胞培養過程狀況頻發,甚至損失珍貴的細胞;其次,很多走-私的牛血清來自發生過瘋牛病疫情的國家,未經檢疫的血清中可能攜帶傳染病毒,對研究和生產人員的生命健康以及下游產品帶來重大威脅。

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