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    技術支持

    BCA法測定蛋白質濃度原理

    發布時間:2022-03-18   點擊次數:559次

     

     

    BCA法測定蛋白質濃度原理:

    BCA與二價銅離子的硫酸銅等其他試劑組成的試劑混合一起即成為蘋果綠,即 BCA 工作試劑。在堿性條件下,BCA 與蛋白質結合時,蛋白質將 Cu2+ 還原為 Cu+,工作試劑由原來的蘋果綠色變為紫色復合物。562 nm 下其光吸收強度與蛋白質濃度成正比。

    BCA 蛋白濃度測定試劑盒,遠慕的蛋白質定量試劑盒(BCA法)提供一個簡單,快捷,兼容去污劑的方法,準確定量總蛋白。

    成分:

    試劑 A,100 mL

    試劑 B,2 mL

    標準蛋白(BSA)1 mL×2,1 mg/mL

    保存條件運輸溫度:室溫(標準蛋白 4~8 ℃ 運輸)

    保存溫度:室溫(標準蛋白 -20 ℃ 保存)

    有效日期:12 個月

    使用方法:

    方法一:96 孔板

    1.配制 BCA 工作液:根據標準品和樣品數量,按 50 體積試劑 A,1 體積試劑 B 配制適量 BCA 工作液。充分混勻。

    2.將蛋白標準品按 0 μL,1 μL,2 μL,4 μL,6 μL,8 μL,10 μL 加入 96 孔板的蛋白標準品孔中。加滅菌雙蒸水補足到 10 μL。取 10 μL 待測樣品加入 96 孔板的待測樣品孔中。每個測定要做 2~3 個平行。

    3.向待測樣品孔和蛋白標準品孔中各加入 200 μL BCA 工作液(即樣品與工作液的體積比為 1:20),混勻。

    4.37 ℃ 溫浴 30 min。冷卻至室溫。

    5.酶標儀 562 nm 波長下測定吸光度。

    6.制作標準曲線。從標準曲線中求出樣品濃度。

     

     

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